病毒学实验技术是病毒学领域知识体系的重要组成部分。本书全面介绍了病毒学实验技术的发展历程、科学原理及其在现代医学和生命科学中的广泛应用。内容涵盖了病毒的分离鉴定、毒力测定、理化特性测定、中和试验、纯化及病毒载体的制备等，并特别强调了实验中的生物安全和防护措施。
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08/2008-03/2014哲学博士 (Ph.D. )
专业：分子生物学与遗传学
美国约翰霍普金斯大学医学院
导师：Robert F. Siliciano教授（美国国家科学院院士）
09/2005-06/2008 理学硕士 (M.S.)
专业：细胞生物学
中山大学生命科学学院
导师：刘林教授（国家杰青、长江学者特聘教授）
09/2001-06/2005 理学学士 (B.S.)
专业：生物技术
中山大学生命科学学院
08/2015-至今 教授、博士生导师慢性病毒感染与宿主免疫广东省免疫学会，副理事长
中国微生物学会病毒学专业委员会，委员
中华医学会医学病毒学分会，青年委员会委员
中国性病艾滋病防治协会，基础研究专业委员会委员
中国性病艾滋病防治协会，青年专业委员会常务委员。
目录
丛书序
前言
第一章病毒学实验技术概论 1
第一 病毒学常用实验技术简介 1
一、病毒的分离与鉴定 1
二、病毒毒力测定 2
三、病毒理化特性测定 2
四、病毒中和试验 2
五、病毒纯化 2
六、病毒载体 2
第二 病毒生物安全和防护技术 3
一、实验室的分级及病原微生物分类 3
二、实验人员个人防护要求 3
三、实验人员消毒灭菌应遵循的原则 4
四、实验室常用消毒剂 4
五、实验室常用消毒灭菌方法 6
六、实验操作过程中的应急处置预案 8
七、生物安全柜内操作要求 8
本章思考题 9
主要参考文献 9
第二章病毒的培养与收获 11
第一 病毒的鸡胚接种、培养和收获 11
一、病毒卵黄囊接种的方法及培养和收获 12
二、尿囊绒毛膜接种 13
三、鸡胚尿囊腔接种 15
第二 病毒的原代细胞接种、培养和收获 16
一、原代细胞的培养 16
二、病毒的接种与培养 18
三、病毒的收获 18
第三 病毒的传代细胞接种、培养和收获 18
一、贴壁接种 19
二、细胞悬浮接种 19
三、病毒液的收获 19
本章思考题 19
主要参考文献 19
第三章病毒的浓缩与纯化 21
第一 物理法 21
一、超速离心法 21
二、吸附法 24
三、电泳法 24
四、超滤法 25
第二 化学法 25
一、中性盐沉淀法 25
二、聚乙二醇沉淀法 26
三、有机溶剂沉淀法 26
四、等电点沉淀法 27
五、两相溶剂间分配系数法 27
第三 层析法 28
一、离子交换层析 28
二、分子筛层析 29
三、亲和层析 30
本章思考题 31
主要参考文献 31
第四章病毒致细胞病变效应观察 33
第一 噬斑 34
一、噬斑测定的原理 34
二、噬斑形成试验和观察方法（双层琼脂平板法） 34
第二 空斑 35
一、空斑形成试验的原理 35
二、空斑形成试验和观察方法（以小鼠肝炎病毒为例） 35
第三 病毒包涵体 36
一、吉姆萨染色的原理 37
二、病毒包涵体形成试验和观察方法 37
第四 合胞体 38
一、合胞体形成的原理 38
二、合胞体形成试验和观察方法 38
本章思考题 38
主要参考文献 39
第五章病毒的红细胞凝集试验和红细胞凝集抑制试验 40
第一 红细胞吸附试验 40
一、病毒易感细胞培养 41
二、接种病毒 41
三、红细胞吸附 41
四、结果观察和判断 41
第二 红细胞凝集试验 41
一、红细胞悬液制备 42
二、病毒液的倍比稀释 42
三、加入红细胞悬液 43
四、结果观察和判断 43
第三 红细胞凝集抑制试验 44
一、试验前准备 44
二、血清的倍比稀释 44
三、加入病毒液 45
四、加入红细胞悬液 45
五、结果观察和判断 45
本章思考题 45
主要参考文献 46
第六章病毒定量及感染力测定 47
第一 空斑形成单位的计算 48
一、基本概念和实验原理 48
二、实验前准备 48
三、实验方法（以?6?孔细胞板为例） 48
四、实验结果 49
第二 半数组织培养感染量（TCID50）的计算 49
一、基本概念和实验原理 49
二、实验前准备 49
三、实验方法（以?40?孔塑料组织培养板接种为例） 49
四、实验结果 50
第三 鸡胚半数感染量（EID50）的计算 51
一、基本概念和实验原理 51
二、实验前准备 51
三、实验方法（以流感病毒为例） 51
第四 半数致死量（LD50）的计算 52
一、基本概念和实验原理 52
二、实验前准备 52
三、实验方法 52
四、实验结果 52
第五 血凝单位（HAU）的计算 53
一、基本概念和实验原理 53
二、实验前准备 53
三、实验方法 53
四、实验结果 53
本章思考题 54
主要参考文献 54
第七章病毒检测技术 55
第一 基因组检测 55
一、核酸电泳 55
二、核酸杂交 58
三、核酸扩增 61
四、基因芯片 64
五、基因测序 65
第二 抗原检测 67
一、免疫荧光技术 67
二、酶联免疫吸附分析 68
三、颗粒凝集试验 70
四、蛋白质印迹法 71
五、免疫亲和层析法 73
六、放射免疫分析 74
第三 抗体检测 77
一、中和试验 77
二、红细胞凝集抑制试验 77
三、补体结合试验 77
四、酶联免疫吸附分析 79
五、蛋白质印迹法 80
六、免疫放射分析 80
第四 指示细胞系技术 81
一、指示细胞系技术平台的建立 82
二、指示细胞系的应用 84
本章思考题 84
主要参考文献 84
第八章病毒中和试验 86
第一 基本原理 86
第二 测定方法 87
一、终点法中和试验 87
二、空斑减数法中和试验 89
三、交叉保护法中和试验 90
本章思考题 91
主要参考文献 91
第九章病毒的电子显微镜观察 92
第一 扫描电子显微镜 92
一、样品制备 93
二、扫描电子显微镜拍摄与分析 93
第二 透射电子显微镜 93
一、病毒样品的超薄切片技术 94
二、负染色病毒样品透射电子显微成像 95
三、病毒免疫电镜技术 96
四、病毒样品的冷冻电镜技术 97
第三 扫描透射电子显微镜 100
一、样品制备 100
二、透射电子显微镜观察 101
本章思考题 101
主要参考文献 101
第十章病毒成像示踪技术 102
第一 病毒的荧光蛋白成像示踪 103
一、荧光蛋白概述 103
二、常见荧光蛋白简介 103
三、病毒蛋白融合荧光蛋白的策略及案例 104
第二 病毒的量子点成像示踪 106
一、量子点概述 106
二、量子点标记病毒的策略 106
本章思考题 109
主要参考文献 109
第十一章工程病毒载体 110
第一 腺病毒载体 111
一、腺病毒概述 111
二、腺病毒载体研究概况 111
三、复制缺陷型、复制型和靶向性重组腺病毒载体 111
四、常用复制缺陷型重组腺病毒包装系统 112
五、实验方案 113
六、注意事项 114
第二 杆状病毒载体 114
一、杆状病毒分类 114
二、杆状病毒生物学特性 114
三、杆状病毒载体概述 115
四、常用杆状病毒表达系统的构成 116
五、实验方案 117
六、注意事项 117
第三 腺相关病毒载体 117
一、腺相关病毒概述 117
二、腺相关病毒载体概述 118
三、腺相关病毒包装系统 118
四、实验方案 118
五、注意事项 119
第四 逆转录病毒载体与慢病毒载体 119
一、逆转录病毒与慢病毒概述 119
二、γ-逆转录病毒载体概述 120
三、慢病毒载体概述 120
四、逆转录病毒和慢病毒包装系统 120
五、实验方案 121
六、注意事项 122
第五 痘病毒载体 122
一、痘病毒概述 122
二、痘病毒载体概述 122
三、痘病毒包装系统 123
四、实验方案 123
五、注意事项 125
第六 RNA?病毒反向遗传学技术 125
一、RNA?病毒反向遗传学概述 125
二、RNA?病毒反向遗传系统的构建原则 126
三、寨卡病毒反向遗传系统 127
四、实验方案 127
五、注意事项 128
本章思考题 128
主要参考文献 129
第十二章病毒抗原制备 130
第一 病毒抗原概述 130
一、病毒抗原及其应用 130
二、病毒抗原的制备历史 131
第二 病毒抗原制备技术 132
一、病毒抗原表达系统 132
二、病毒抗原的纯化技术 135
本章思考题 137
主要参考文献 137
第十三章病毒基因组的生物信息学分析 139
第一 病毒组学分析和新病原发现 139
一、病毒宏基因组的数据处理和组装 139
二、病毒的发现和分类 140
三、病毒基因组的完善与功能注释 141
四、病毒组的生态学比较 142
第二 病毒的进化分析 142
一、病毒进化树的构建 143
二、病毒基因组的重组分析 143
三、病毒适应性进化分析 144
四、病毒和宿主间相互关系分析 144
第三 病毒的生态学和分子流行病学分析 144
一、分子钟模型的检验和分歧时间的估计 144
二、地理传播分析 145
三、病毒的种群遗传学分析 146
本章思考题 147
主要参考文献 147
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